CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO industrial y de servicios No. 199

"EMILIANO ZAPATA SALAZAR"

MIXQUIAHUALA HGO. 

BIOLOGÍA CONTEMPORÁNEA
 LABORATORIO CLÍNICO 
6 DM

CÉLULAS

Las células eucariotas poseen un núcleo definido con el material genético organizado en cromosomas. Todos los organismos multicelulares están formados por células eucariotas y también muchos organismos unicelulares y coloniales.

MATERIAL:                                       SUSTANCIAS:

1 microscopio óptico                           Agua destilada

5 portaobjetos                                      Reactivos de Gram: cristal violeta, lugol, 

5 cubreobjetos                                     alcohol-cetona, safranina.

1 agitador                                            Sudan III

1 bisturí con navaja                             Yogurt casero

1 vaso de precipitado de 100 ml         Agua de charco o de florero

2 goteros                                             Cebolla, papa, plátano, manzana, papaya,

1 servilleta de papel                            aguacate, nuez, zanahoria, betabel, flores de gladiola

1 trozo de papel seda                          roja, elodea (planta acuática que llaman cola de zorro).

1 caja de petri 

PROCEDIMIENTO:
Células bacterianas
Las bacterias con células muy pequeñas (1 a 3 micrómetros) y pueden tener forma esférica (cocos), de bastón (bacilos) o espiral (espirilos).
1- Haz un frotis de la muestra de yogurt.
2- Realiza una tincion de Gram.
3- Coloca un portaobjetos y obsérvalo a inmersión.
4- Identifica la forma de la célula, la pared y el citoplasma.


Bacterias verdes- azules (cianobacterias) 
Las cianobacterias son organismos procariontes fotosinteticos. La clorofila que contiene esta dispersa en el citoplasma. Ademas de la clorofila, las cianofitas poseen pigmentos accesorios (carotenoides y ficobilinas)
1- coloca sobre un portaobjetos una gota de agua de charco estancado.
2- coloca un cubreobjetos y objetos y observa al microscopio con el seco fuerte.


Aminoplastos en plátano 
Las células del plátano también poseen aminoplastos que almacenan almidón pero que se diferencian de los aminoplastos de la papa en su morfología.
1- raspa una pequeña cantidad de tejido de la superficie del fruto y dispersarla en el portaobjetos.
2- agrega una gota de lugol, coloca un cubreobjetos y observa con seco débil y fuerte.
3- compara la morfología de los aminoplastos de papa y plátano
4- repite el mismo proceso con manzana y papaya.

Cromoplastos de zanahoria y betabel.
En la zanahoria y el betabel, asi como en otras partes de distintas especies de plantas, se encuentran cromoplastos que contienen pigmentos amarillos, naranjas o rojos, llamados carotenos.
1- corta una delgada capa de tejido de la porción mas extrema de la zanahoria, colócala sobre una gota de agua en el portaobjetos y acopla un cubreobjetos.
2- observa en el microscopio con el seco débil y fuerte.
3- repite el procedimiento con el betabel.


Cromoplastos en flores coloridas.
Las flores de color entre azul y rojo contienen en los cromoplastos unos pigmentos llamados antoclaninas.
1- desprende la epidermis lo mas delgada que sea posible de una flor colorida, puede ser gladiola, colócala sobre el portaobjetos con una gota de agua destilada y cúbrela con el cubreobjetos.
2- observa con seco débil y seco fuerte.

Oleaplastos en células de aguacate o nuez.
Son plastidios que almacenan aceites como reserva de compuestos energéticos.
1- haz un raspado de aguacate y coloca una pequeña porción sobre un portaobjetos con una gota de agua.
2- agrega una gota de Sudan III y observa con seco débil y seco fuerte, los oleoplastos se ven de color naranja.
3- repetir el procedimiento con la nuez.


Pared celular y núcleos en células de catafilia de cebolla.
La cebolla es un tallo del cual nacen las hojas modificadas llamadas catafilias, que no poseen clorofila y almacenan una gran cantidad de carbohidratos.
1- desprende con una pinza la epidermis interna de un trozo de catafilia de cebolla, colócala sobre un portaobjetos añadiendo una gota de agua y una de lugol, y acopla un cubreobjetos.
2- observa con objetivos seco débil y seco fuerte.

Cloroplastos y pared celular en células de hoja de elodea.
Las hojas de elodea se pueden observar al MO sin ninguna preparación previa ya que están formadas por dos capaz de células.
1- coloca una hojita de elodea sobre un portaobjetos, agrégale una gota de agua y colocale un cubreobjetos.
2- observar en seco débil y seco fuerte.

Aminoplastos en tubérculos de papa.
Los aminoplastos son plastidios que contiene el almidón presente en el tubérculo de la papa.
1-  corta un trozo de tubérculo de papa y raspa la superficie de corte con una hoja de afeitar o de bisturí, coloca el raspado en una gota de agua cobre un cubreobjetos, agrega una gota de lugol y acopla un cubreobjetos.
2- observar con seco débil y seco fuerte.
3- localiza los aminoplastos teñidos de azul.


EVIDENCIAS:

PLATANO







PAPA

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"EMILIANO ZAPATA SALAZAR"

MIXQUIAHUALA HGO.

LABORATORIO CLÍNICO

6 DM

BIOMOLECULAS.

En esta actividad aplicaras la metodología para comprender y resolver problemas de su entorno utilizando las ciencias experimentales, ademas de que seguirás normas de seguridad cuando uses y manejes sustancias, instrumentos y equipos en el laboratorio de química y biología.

INTRODUCCIÓN:
Entre los compuestos fundamentales de la materia viva de las células encontramos los carbohidratos, lípidos, y proteínas; por esta razón, los alimentos que consumen todos los heterotrofos, incluido el ser humano, deben contener necesariamente estas macromoleculas.
Mediante el uso de pruebas químicas sencillas se pueden identificar en los alimentos la presencia de estas macromoleculas.

OBJETIVO:
El alumno distinguirá en forma practica que alimentos contienen carbohidratos y cuales proteínas y grasas.

MATERIALES:                                                               SUSTANCIAS: Para carbohidratos
- 10 tubos de ensaye                                                    Reactivo de Fehling
- 1 gradilla                                                                   Ácido clorhídrico al 50%
- 2 vasos de precipitado de 100 ml                             Lugol (solución alcohólica de yodo)
- 1 agitador                                                                
- 1 mechero de Bunsen                                               Para proteínas:
- 2 pinzas para tubo de ensaye                                    Reactivo de Biuret
- 1 gotero                                                                    Ácido nítrico concentrado
- 1 pliego de papel estraza                                          Hidróxido de amonio concentrado

  Para lipidos:
                 Sudan II

MUESTRAS DE ALIMENTOS:
- Harinas (trigo)
- Frutas (manzana)
- Verduras (zanahoria)
- Carnes (hígado de pollo)
- Lácteos (queso)
- Semillas (haba)

De preferencia que los alimentos estén hervidos, a excepción de las frutas.
Trabajaras con cantidades suficientes para que alcances a observar las reacciones, pero que no pongan en riesgo su integridad física.

PROCEDIMIENTO:
Reacciones para identificar carbohidratos.

1- Prueba de Lugol (se utiliza para identificar almidones)
- Coloca una pequeña cantidad de la muestra en un tubo de ensayo.
- Agrega dos gotas de Lugol
- Observa el color que toma la muestra al reaccionar con el Lugol.
- Repite la prueba en por lo menos 5 alimentos diferentes.
- Anota los resultados en la tabla de registro.
Si la muestra contiene almidón, con el Lugol adquirirá una coloración azul oscuro (prueba positiva); si no, tomara el color ámbar del reactivo (prueba negativa).
Los residuos contienen almidones y yoduros, que de acuerdo con normas ecológicas ECOL se pueden verter directamente al desagüe.

2- Prueba de Fehling (se utiliza para identificar azucares reductores)
- Agrega 0.5 ml de solución de Fehling A y 0.5 ml de Fehling B a una pequeña porción de muestra colocada en un tubo de ensaye.
- Agrega 2 ml de agua si la muestra es solida.
- Calienta a ebullición por 2 min, cuidando que la muestra no se proyecte. El calentamiento puede realizarse en baño maría, y la boca de los tubos debe estar dirigida donde no haya personas.
- Observa el color de la reacción y anota los resultados.
- Repite la prueba con por los menos 5 alimentos diferentes. Puedes preparar todos los tubos y meterlos juntos al baño maría.
Si la muestra contiene azucares reductores, al reaccionar con el reactivo se formara un precipitado café rojizo (prueba positiva); si no, la muestra queda de color azul del reactivo (prueba negativa).
Los residuos contienen cobre, por lo que la parte liquida debe colocarse en un contenedor plástico para su tratamiento o almacenado temporal, hasta que pueda desecharse correctamente.

Reacciones para identificar proteínas.

1- Prueba de Biuret (se utiliza para identificar proteínas y polipeptidos, no menores de tres aminoácidos, en solución o al estado solido)
- Agrega 1 ml de reactivo de Biuret a una pequeña porción de muestra colocada en cada tubo de ensaye.
- Observa la coloración que toma la muestra.
- Anota los resultados
- Repite la prueba en por lo menos 5 alimentos diferentes.
Si en la muestra hay proteínas se observara que la muestra toma una coloración violeta o morada (prueba positiva) si se queda de color azul, quiere decir que en la muestra no hay proteínas (prueba negativa)
Los residuos contienen cobre, por lo que la parte liquida debe colocarse en un contenedor plástico para su tratamiento o almacenado temporal, hasta que pueda desecharse correctamente.

2- Reacción xantoproteica (se utiliza para identificar proteínas que contienen aminoácidos aromáticos)
- Agregar 1 ml de ácido nítrico concentrado a una pequeña porción de muestra colocada en un tubo de ensaye, calienta con precaución, sujetando el tubo con unas pinzas para tubo de ensaye, y metiendo y sacando el tubo de la flama para evitar que se proyecte la solución, y dirigiendo la boca hacia donde no haya personas. Puedes calentarlos en baño maría. Espera que enfrié.
- Deja resbalar por las paredes del tubo 1 ml de hidróxido de amonio (no respires los vapores) sin agitar, de tal forma que se formen dos capas.
- Anota los resultados
- Repite la prueba en por lo menos 5 alimentos diferentes.
Si en la muestra hay proteínas, se formara un anillo de color naranja entre las capas formadas por el ácido y el hidróxido (prueba positiva).
Los residuos contienen un ácido y una base, por lo que mezcla con mucho cuidado las dos capas para que ambas soluciones (ácido y base) se neutralicen y puedas desecharla.

RESULTADOS.

1- Para anotar los resultados obtenidos en cada una de las pruebas, se escribe +++ cuando el resultado de la prueba sea muy positivo (el color sea bien definido, lo cual indica alta concentración de la biomolecula buscada). ++ cuando el resultado de la prueba sea regularmente positivo.+ para poco positivo y - para negativo (cuando no de el color esperado, lo que indicara ausencia de la biomolecula)

ALIMENTO                     CARBOHIDRATOS                          PROTEÍNAS
                                       LUGOL        FEHLING        BIURET        XANTOPROTEICA
1- Trigo                             ++                 ------                    -                        +++
2- Manzana                      +++                ------                 +++                     +++
3- Hígado                           -                   ------                    -                        +++
4- Habas                          +++                ------                 +++                      +++      
5- Queso                            -                   ------                    -                         +++
6- Zanahorias                    -                   ------                    -                         +++