CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO industrial y de servicios No. 199
"EMILIANO ZAPATA SALAZAR"
MIXQUIAHUALA HGO.
LABORATORIO CLÍNICO
6 DM
BIOMOLECULAS.
En esta actividad aplicaras la metodología para comprender y resolver problemas de su entorno utilizando las ciencias experimentales, ademas de que seguirás normas de seguridad cuando uses y manejes sustancias, instrumentos y equipos en el laboratorio de química y biología.
INTRODUCCIÓN:
Entre los compuestos fundamentales de la materia viva de las células encontramos los carbohidratos, lípidos, y proteínas; por esta razón, los alimentos que consumen todos los heterotrofos, incluido el ser humano, deben contener necesariamente estas macromoleculas.
Mediante el uso de pruebas químicas sencillas se pueden identificar en los alimentos la presencia de estas macromoleculas.
OBJETIVO:
El alumno distinguirá en forma practica que alimentos contienen carbohidratos y cuales proteínas y grasas.
MATERIALES: SUSTANCIAS: Para carbohidratos
- 10 tubos de ensaye Reactivo de Fehling
- 1 gradilla Ácido clorhídrico al 50%
- 2 vasos de precipitado de 100 ml Lugol (solución alcohólica de yodo)
- 1 agitador
- 1 mechero de Bunsen Para proteínas:
- 2 pinzas para tubo de ensaye Reactivo de Biuret
- 1 gotero Ácido nítrico concentrado
- 1 pliego de papel estraza Hidróxido de amonio concentrado
Para lipidos:
Sudan II
MUESTRAS DE ALIMENTOS:
- Harinas (trigo)
- Frutas (manzana)
- Verduras (zanahoria)
- Carnes (hígado de pollo)
- Lácteos (queso)
- Semillas (haba)
De preferencia que los alimentos estén hervidos, a excepción de las frutas.
Trabajaras con cantidades suficientes para que alcances a observar las reacciones, pero que no pongan en riesgo su integridad física.
PROCEDIMIENTO:
Reacciones para identificar carbohidratos.
1- Prueba de Lugol (se utiliza para identificar almidones)
- Coloca una pequeña cantidad de la muestra en un tubo de ensayo.
- Agrega dos gotas de Lugol
- Observa el color que toma la muestra al reaccionar con el Lugol.
- Repite la prueba en por lo menos 5 alimentos diferentes.
- Anota los resultados en la tabla de registro.
Si la muestra contiene almidón, con el Lugol adquirirá una coloración azul oscuro (prueba positiva); si no, tomara el color ámbar del reactivo (prueba negativa).
Los residuos contienen almidones y yoduros, que de acuerdo con normas ecológicas ECOL se pueden verter directamente al desagüe.
2- Prueba de Fehling (se utiliza para identificar azucares reductores)
- Agrega 0.5 ml de solución de Fehling A y 0.5 ml de Fehling B a una pequeña porción de muestra colocada en un tubo de ensaye.
- Agrega 2 ml de agua si la muestra es solida.
- Calienta a ebullición por 2 min, cuidando que la muestra no se proyecte. El calentamiento puede realizarse en baño maría, y la boca de los tubos debe estar dirigida donde no haya personas.
- Observa el color de la reacción y anota los resultados.
- Repite la prueba con por los menos 5 alimentos diferentes. Puedes preparar todos los tubos y meterlos juntos al baño maría.
Si la muestra contiene azucares reductores, al reaccionar con el reactivo se formara un precipitado café rojizo (prueba positiva); si no, la muestra queda de color azul del reactivo (prueba negativa).
Los residuos contienen cobre, por lo que la parte liquida debe colocarse en un contenedor plástico para su tratamiento o almacenado temporal, hasta que pueda desecharse correctamente.
Reacciones para identificar proteínas.
1- Prueba de Biuret (se utiliza para identificar proteínas y polipeptidos, no menores de tres aminoácidos, en solución o al estado solido)
- Agrega 1 ml de reactivo de Biuret a una pequeña porción de muestra colocada en cada tubo de ensaye.
- Observa la coloración que toma la muestra.
- Anota los resultados
- Repite la prueba en por lo menos 5 alimentos diferentes.
Si en la muestra hay proteínas se observara que la muestra toma una coloración violeta o morada (prueba positiva) si se queda de color azul, quiere decir que en la muestra no hay proteínas (prueba negativa)
Los residuos contienen cobre, por lo que la parte liquida debe colocarse en un contenedor plástico para su tratamiento o almacenado temporal, hasta que pueda desecharse correctamente.
2- Reacción xantoproteica (se utiliza para identificar proteínas que contienen aminoácidos aromáticos)
- Agregar 1 ml de ácido nítrico concentrado a una pequeña porción de muestra colocada en un tubo de ensaye, calienta con precaución, sujetando el tubo con unas pinzas para tubo de ensaye, y metiendo y sacando el tubo de la flama para evitar que se proyecte la solución, y dirigiendo la boca hacia donde no haya personas. Puedes calentarlos en baño maría. Espera que enfrié.
- Deja resbalar por las paredes del tubo 1 ml de hidróxido de amonio (no respires los vapores) sin agitar, de tal forma que se formen dos capas.
- Anota los resultados
- Repite la prueba en por lo menos 5 alimentos diferentes.
Si en la muestra hay proteínas, se formara un anillo de color naranja entre las capas formadas por el ácido y el hidróxido (prueba positiva).
Los residuos contienen un ácido y una base, por lo que mezcla con mucho cuidado las dos capas para que ambas soluciones (ácido y base) se neutralicen y puedas desecharla.
RESULTADOS.
1- Para anotar los resultados obtenidos en cada una de las pruebas, se escribe +++ cuando el resultado de la prueba sea muy positivo (el color sea bien definido, lo cual indica alta concentración de la biomolecula buscada). ++ cuando el resultado de la prueba sea regularmente positivo.+ para poco positivo y - para negativo (cuando no de el color esperado, lo que indicara ausencia de la biomolecula)ALIMENTO CARBOHIDRATOS PROTEÍNAS
LUGOL FEHLING BIURET XANTOPROTEICA
1- Trigo ++ ------ - +++
2- Manzana +++ ------ +++ +++
3- Hígado - ------ - +++
4- Habas +++ ------ +++ +++
5- Queso - ------ - +++
6- Zanahorias - ------ - +++
