CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO INDUSTRIAL Y DE SERVICIOS

No. 199

ANALIZA Y FRACCIONA SANGRE CON FINES TRANSFUSIONALES. 

     LABORATORIO CLÍNICO

DETERMINACIÓN DE AGLUTINOGENOS (TIPADO GLOBULAR)

PRINCIPIO: En la membrana del glóbulo rojo existen complejos químicos llamados antígenos que representan los llamado grupos o factores sanguíneos. 

Se sabe que estos complejos químicos se han generado de una sustancia llamada precursora, llamada sustancia H (humana). Sobre esta sustancia se adhieren carbohidratos en un orden determinado. Para la sangre de tipo cero "O" se unen dos moléculas de galactosa, una de mucosa, una de glucosa y una de glucosaina. 

Sobre esta cadena puede adherirse una nueva molécula y se cambia el tipo, si es de glucosamina se tiene el grupo "A" y si es de galactosa se tiene el grupo "B". Si se unen ambas moléculas en diversa posición se tiene el grupo AB:

Los primeros grupos sanguíneos que se descubrieron fueron los llamados ABO y actualmente se conocen muchos mas. 

El sistema Rh es independiente del sistema ABO, pero igual de importante en la tipificación sanguínea. 

Hay antígenos presentes en los eritrocitos de casi todas las personas y se les llama Universales, otros antígenos se han concentrado en una sola familia y se les llama familiares y se han encontrado algunos otros que pertenecen solamente a un individuo y se les llama personales.

La importancia de la determinación de los grupos sanguíneos y Rh en el laboratorio es en las transfusiones sanguíneas y en la eritroblastosis fetal. 

FACTOR Rh.

OBJETIVO: El alumno determinara el grupo sanguíneo y el factor Rh de una muestra sanguínea, utilizando los antisueros correspondientes y previa demostración correctamente.

INTRODUCCIÓN: Los grupos sanguíneos se han clasificado así por poseer características diferentes, estas características son los antígenos (Aglutinogenos) y los anticuerpos (Aglutininas) que son los responsables de las reacciones adversas inmunologicas en las transfusiones. 

MATERIAL:                                                                             REACTIVOS:

1 EQUIPO DE EXTRACCIÓN SANGUÍNEA                       SUERO ANTI A

1 PLACA DE VIDRIO EXCAVADA                                     SUERO ANTI B

APLICADORES DE MADERA (PALILLOS)                       SUERO ANTI D

LANCETA ESTÉRIL                                                             

MÉTODO PARA PORTAOBJETOS O PLACA

TÉCNICA: Se utiliza la punción cutánea por medio de la lanceta, se desecha la primera gota y se deposita 1 gota en cada una de las excavaciones de la placa en forma horizontal o marcar con letras A, B, y Rh, posteriormente se añade una gota de suero Anti A, Anti B y Anti D respectivamente. 

Mezclar perfectamente con un hisopo (aplicador) cada preparación (No contaminar las diferentes preparaciones). 

Agitar suavemente la placa con movimientos circulares durante 30 segundos aproximadamente.

Leer el resultado (una aglutinación macroscopica indicara la reacción)

Anti A               Anti B               Anti D               El grupo sanguíneo y su Factor será:

   +                         -                        +                                   A Rh Positivo

   +                         -                        -                                    A Rh Negativo 

   -                         +                        +                                   B Rh Positivo 

   -                         +                        -                                    B Rh Negativo

   +                        +                        +                                   AB Rh Positivo

   +                        +                        +                                   AB Rh Negativo

   -                         -                         +                                   O Rh Positivo

   -                         -                         -                                    O Rh Negativo 

En donde (+) Existencia de aglutinación.

                (-) Ausencia de aglutinación. 

INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS

Si existe aglutinación en el tubo "A" la sangre es tipo "A"

Si existe aglutinación en el tubo "B" la sangre es del tipo "B"

Si existe aglutinación en los tubos  A y B la sangre es del tipo "AB"

Si no existe aglutinación en los tubos A y B la sangre es del tipo "O"

Si existe aglutinación en el tubo Rh la sangre sera de factor Rh positivo.

Si no existe aglutinación en el tubo Rh la sangre sera de factor Rh negativo. 

GRUPO

SANGUÍNEO                                          ANTISUEROS

                                    ANTI A              ANTI B              ANTI AB              ANTI D

A                                      +                          -                          +                           -

B                                      -                           +                         +                           -

AB                                   +                          +                         +                           -

O                                      -                           -                          -                           -

D                                      -                           -                          -                           +

En donde (+) Existencia de aglutinación.

                (-) Ausencia de aglutinación.

RESULTADOS

Sharon      A Rh Positivo

Ilse            O Rh Positivo 

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No.199

 REALIZA ANÁLISIS HEMATOLOGICOS DE SERIE BLANCA Y HEMOSTASIA.

                                                                  LABORATORIO CLÍNICO

RECUENTO DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS

INTRODUCCIÓN:

El recuento diferencial de leucocitos consiste en reconocer y valorar las proporciones relativas de las distintas variedades de glóbulos blancos que se observan en un frotis teñido de sangre.

Al conocer la proporción de las células sanguíneas que estas presentes en el torrente sanguíneo cualquier trastorno patológico que altere el sistema hematopoyetico podría verse reflejado en un cambio de la proporción de una especie celular. Para el recuento diferencial se tiene que observar un mínimo de 100 leucocitos.

Hay varios métodos de recuento diferencial de leucocitos pero el mas utilizado es el de almena y en linea. 

MATERIAL Y REACTIVOS:

1. Frotis sanguíneo teñido.
2. Microscopio.
3. Aceite de inmersión.
4. Un contador de células.

 PROCEDIMIENTO:

1. Se coloca el frotis en el microscopio y se enfoca.
2. Se le agrega una gota de aceite de inmersión y se observa con el objetivo de 100X.
3. Si el recuento se hace en linea se empieza en un borde del frotis hasta el otro borde en linea paralela hasta contar 100 leucocitos.
4. Se van contando los mononucleares (monósitos y linfocitos) y los polimorfonucleares (neutrófilos, eosinófilos y basófilos) según su morfología.
5. Se reportan en % (valor relativo) o en valor absoluto (mm3)

VALORES DE REFERENCIA.

                                        ADULTOS                                                     NIÑOS

LINFOCITOS:                 20-55%                                                          20-50%

MONOCITOS:                  2-6%                                                              0-9%

EOSINOFILOS:                1-5%                                                              0-8%

BASOFILOS:                    0-1%                                                              0-1%

NEUTROFILOS:             45-70%                                                          20-60%

BANDAS:                          0-5%                                                              1-6%

RESULTADOS

LINFOCITOS:               34%       

MONOCITOS:               4%     

EOSINOFILOS:             2%   

BASOFILOS:                 1%           

NEUTROFILOS:            53%   

BANDAS:                      6%

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REALIZA ANÁLISIS HEMATOLÓGICOS DE SERIE BLANCA Y HEMOSTASIA. 

        

     LETICIA ORTIZ AGUILAR                                          5 DM   LABORATORIO CLINICO.

CONTEO DE LEUCOCITOS.

INTRODUCCIÓN:
El conteo de los elementos formes de la sangre es indispensable para la hematología diagnostica. Para contar los leucocitos se diluye una cantidad exacta de sangre con el liquido de Turk, que es una solución hipotonica que destruye a los eritrocitos y conserva la estructura de los leucocitos, esta mezcla se coloca en una cámara de Neubauer y se cuenta el numero de células en los cuadros indicados.

MATERIAL Y REACTIVOS:

1.- Una pipeta de thoma para glóbulos blancos.            
2.- Una cámara de Neubauer.
3.- Un microscopio.
4.- Solución de Turk.
5.- Gasas.
6.- Sangre venosa con EDTA.

PROCEDIMIENTO:
1.- Obtener sangre venosa con EDTA y mezclar perfectamente.
2.- Aspirar sangre con la pipeta de thoma asta la marca 0.5.
3.- Limpiar la parte externa de la pipeta con gasa o papel absorbente.
4.- Aspirar liquido de Turk hasta la marca 11.
5.- Retirar la boquilla de la pipeta y sellar los extremos con papel parafilm.
6.- Agitar la pipeta de thoma de 3 a 5 min. y preparar la cámara con el cubrehematímetro.
7.- Descartar las primeras 3 gotas y llenar la cámara por capilaridad por uno de los bordes del cubrehematímetro, sin que se formen burbujas o sobrepasen los canales de la cámara.

8.- Dejar reposar de 3 a 5 min la cámara con la muestra.

9.- Enfocar la cámara de 1 microscopio y contar los leucocitos con el objetivo seco débil en 64 cuadros de las 4 cuadriculas de los extremos.
10.- Multiplicar el numero de leucocitos contados por 50.

VALOR DE REFERENCIA:
5000 a 10000/mm3

RESULTADOS OBTENIDOS:

* Johana         5853 Leu/mm3            

*Eduardo      7150 Leu/mm3            

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CONCLUSIÓN 

Los leucocitos son las células sanguíneas que dentro del organismo participan desarrollando diferentes funciones como son: fagocitosis, defensa inmunológica específica o inespecífica.
El recuento leucocitario representa el número de leucocitos en un litro  de sangre completa. La cuantificación o recuento de leucocitos es muy importante para el diagnóstico de enfermedades.
Con esta practica aprenderemos  a realizar y aplicar la metodología para un recuento de Leucocitos por milímetro cúbico de sangre e interpretar el resultado.

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Practica #5

Reticulocitos

OBJETIVO: Que el alumno aprenda a identificar y cuantificar correctamente a los reticulocitos.

INTRODUCCIÓN: Los reticulocitos son eritrocitos jóvenes y contienen en su interior RNA-ribosonal el cual puede observarse en forma de red (De ahí su nombre) mediante un colorante supravital.

Cuando en la medula ósea aumenta la eritropoyesis, aumenta también el número de reticulocitos que salen hacia la circulación.

MATERIAL, REACTIVOS Y EQUIPO

o   Sangre venosa con EDTA.

o   Colorante de azul de cresil brillante o nuevo azul de metileno.

o   Tubos de ensaye.

o   Portaobjetos.

o   Pipetas Pasteur  tallo corto con bulbo.

o   Baño maría.

o   Microscopio.

o   Aceite de inmersión.

PROCEDIMIENTO

1. 1. Mezclar la muestra sanguínea y en un tubo de ensaye colocar 5 gotas con una pipeta pasteur.
2.            Agregarle 5 gotas del colorante con una pipeta pasteur y mezclar
3.            Incubar el tubo de ensaye a  37º C  durante 15 minutos en el baño maria.
4.           Mezclar la suspensión y realizar un frotis en portaobjetos.
5.           Dejarlo secar a temperatura ambiente, agregarle una gota de aceite de inmersión y observar    con el objetivo 100 X.

Buscar células que presenten una red con coloración azul (reticulocitos). Contar 1000  eritrocitos en diferentes partes del frotis e ir registrando el número de reticulocitos  observados.

EVIDENCCIAS

 

 

RESULTADOS

 :

  Numero de reticulocitos observados x 100

                                    Número total de eritrocitos

 

 32 x 100  =   3200  = 3.3% 

   1000          1000

VALORES DE REFERENCIA:                                

Adultos:    0.5.-2.0 %

 Niños:        2.5-6.5%

RESULTADOS:

Muestra 1:   1.3% 

Muestra 2:    3.3%

CONCLUSIÓN

El numero de reticulocitos en la sangre es un signo de la rapidez con la cual están siendo producidos y liberados por parte de la médula ósea.

 Por eso es muy importante realizar esta practica para aprender a realizar el conteo de reticulositos de la forma correcta.

ya que nos sirve para saber si nuestro nivel de reticulositos esta bajo, alto o en estado normal.

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HEMATOCRITO

INTRODUCCION:

El hematocrito es el volumen que ocupan los eritrocitos en una mestra sanguínea y se expresa en porcentaje.

La determinación de hematocrito es un método sencillo y confiable para detectar anemia o policitemia.

El hematocrito se puede determinar por dos métodos:

·         

       MACROMETODO (WINTROBE)

·         MICROMETODO.

MATERIAL Y REACTIVOS                                

·         Tubo de Wintrobe.

·         Tubo capilar.

·         Plastilina.

·         Centrifuga.

·         Pipeta pasteur tallo largó.

·         Equipo para venopunción.

·         Lector para hemara venopuncion.

·         )

·         s metodos_emia o policitemia.

·         na mestra sanguinea tocrito o regla.

·         Sangre venosa.

TECNICA (MACROMETODO)

1.-Mezclar la muestra sanguínea suavemente y con una pipeta pasteur o canula llenar el tubo de wintrobe, colocando la punta de la pipeta hasta el fondo del tubo, la punta de la pipeta se va elevando pero permaneciendo por debajo del menisco de sangre para evitar la formación de burbujas o espuma.

2.-El tubo se llena hasta la marca 100 con la muestra sanguínea y se pone a centrifugar durante 30 minutos a 3000 r.p.m.

3.-Se efectua la lectura. 

TÉCNICA (MICROMETODO)

1.- Mezclar la muestra sanguínea adecuadamente y llenar un tubo capilar hasta 3/4 partes.

2.- El extremo vació que no estuvo en contacto con la sangre se sella con plastilina o calor.

3.- El tubo con la muestra sanguínea se coloca en la microcentrifuga a 10,000 r.p.m. 

4.- Leer el porcentaje de hematocrito en el lector o medirlo con una regla. 

EVIDENCIAS 

 

 

RESULTADOS

Muestra 1:    Micrometodo - 47%

                    Macrometodo - 65%

Muestra 2:     Micrometodo - 44%

                    Macrometodo - 43%

conclusión  

 Durante esta practica aprendimos a realizar el hematocrito que es importante para poder determinar si nuestro paciente presenta anemia o policitemia.

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"EMILIANO ZAPATA SALAZAR"

ÍNDICES ERITROCITARIOS

REALIZA ANÁLISIS HEMATOLOGICOS DE SERIE ROJA.

LETICIA ORTIZ AGUILAR                                                           4 DM

NO. DE LISTA: 35

LABORATORIO CLÍNICO

INDICES ERITROCITARIOS (VALORES ABSOLUTOS)

FORMULAS Y RESULTADOS:

VALOR Hto. % x 10     = V.C.C en M3

N° ERITROCITOS/L

VALORES NORMALES:

82 - 92 M

46% x 10 = 88.8 M3                 NORMAL

  5.18/L

     Hb en gr/dL x 10    = H.C.M. en pg

N° ERITROCITOS/L

VALORES NORMALES:

28 - 32 pg

15.28 gr/dL x 10 = 29.49 pg     NORMAL 

       5.18/L

Hb en gr/dL x 10  = C.H.C.M. en %

VALOR Hto %

VALORES NORMALES.

32 - 36

15.28 gr/dL x 10  = 33.21%      NORMAL

         46%

 fotografías 

  

 

 

conclusión 

En esta practica que realizamos se trato de los indices eritrocitarios con la

finalidad de que aplicaramos  lo ya aprendido durante practicas pasadas como es recuento eritrocitario, determinación de hemoglobina y hematocrito; lo cual nos ayuda a detrminar resultados para comprobar si nuestro pasiente se encuentra con niveles bajos de hemoglobina, hematocrito etc.