CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO INDUSTRIAL Y DE SERVICIOS  No. 199  

Practica #5

Reticulocitos

OBJETIVO: Que el alumno aprenda a identificar y cuantificar correctamente a los reticulocitos.

INTRODUCCIÓN: Los reticulocitos son eritrocitos jóvenes y contienen en su interior RNA-ribosonal el cual puede observarse en forma de red (De ahí su nombre) mediante un colorante supravital.

Cuando en la medula ósea aumenta la eritropoyesis, aumenta también el número de reticulocitos que salen hacia la circulación.

MATERIAL, REACTIVOS Y EQUIPO

o   Sangre venosa con EDTA.

o   Colorante de azul de cresil brillante o nuevo azul de metileno.

o   Tubos de ensaye.

o   Portaobjetos.

o   Pipetas Pasteur  tallo corto con bulbo.

o   Baño maría.

o   Microscopio.

o   Aceite de inmersión.

PROCEDIMIENTO

1. 1. Mezclar la muestra sanguínea y en un tubo de ensaye colocar 5 gotas con una pipeta pasteur.
2.            Agregarle 5 gotas del colorante con una pipeta pasteur y mezclar
3.            Incubar el tubo de ensaye a  37º C  durante 15 minutos en el baño maria.
4.           Mezclar la suspensión y realizar un frotis en portaobjetos.
5.           Dejarlo secar a temperatura ambiente, agregarle una gota de aceite de inmersión y observar    con el objetivo 100 X.

Buscar células que presenten una red con coloración azul (reticulocitos). Contar 1000  eritrocitos en diferentes partes del frotis e ir registrando el número de reticulocitos  observados.

EVIDENCCIAS

 

 

RESULTADOS

 :

  Numero de reticulocitos observados x 100

                                    Número total de eritrocitos

 

 32 x 100  =   3200  = 3.3% 

   1000          1000

VALORES DE REFERENCIA:                                

Adultos:    0.5.-2.0 %

 Niños:        2.5-6.5%

RESULTADOS:

Muestra 1:   1.3% 

Muestra 2:    3.3%

CONCLUSIÓN

El numero de reticulocitos en la sangre es un signo de la rapidez con la cual están siendo producidos y liberados por parte de la médula ósea.

 Por eso es muy importante realizar esta practica para aprender a realizar el conteo de reticulositos de la forma correcta.

ya que nos sirve para saber si nuestro nivel de reticulositos esta bajo, alto o en estado normal.

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HEMATOCRITO

INTRODUCCION:

El hematocrito es el volumen que ocupan los eritrocitos en una mestra sanguínea y se expresa en porcentaje.

La determinación de hematocrito es un método sencillo y confiable para detectar anemia o policitemia.

El hematocrito se puede determinar por dos métodos:

·         

       MACROMETODO (WINTROBE)

·         MICROMETODO.

MATERIAL Y REACTIVOS                                

·         Tubo de Wintrobe.

·         Tubo capilar.

·         Plastilina.

·         Centrifuga.

·         Pipeta pasteur tallo largó.

·         Equipo para venopunción.

·         Lector para hemara venopuncion.

·         )

·         s metodos_emia o policitemia.

·         na mestra sanguinea tocrito o regla.

·         Sangre venosa.

TECNICA (MACROMETODO)

1.-Mezclar la muestra sanguínea suavemente y con una pipeta pasteur o canula llenar el tubo de wintrobe, colocando la punta de la pipeta hasta el fondo del tubo, la punta de la pipeta se va elevando pero permaneciendo por debajo del menisco de sangre para evitar la formación de burbujas o espuma.

2.-El tubo se llena hasta la marca 100 con la muestra sanguínea y se pone a centrifugar durante 30 minutos a 3000 r.p.m.

3.-Se efectua la lectura. 

TÉCNICA (MICROMETODO)

1.- Mezclar la muestra sanguínea adecuadamente y llenar un tubo capilar hasta 3/4 partes.

2.- El extremo vació que no estuvo en contacto con la sangre se sella con plastilina o calor.

3.- El tubo con la muestra sanguínea se coloca en la microcentrifuga a 10,000 r.p.m. 

4.- Leer el porcentaje de hematocrito en el lector o medirlo con una regla. 

EVIDENCIAS 

 

 

RESULTADOS

Muestra 1:    Micrometodo - 47%

                    Macrometodo - 65%

Muestra 2:     Micrometodo - 44%

                    Macrometodo - 43%

conclusión  

 Durante esta practica aprendimos a realizar el hematocrito que es importante para poder determinar si nuestro paciente presenta anemia o policitemia.

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"EMILIANO ZAPATA SALAZAR"

ÍNDICES ERITROCITARIOS

REALIZA ANÁLISIS HEMATOLOGICOS DE SERIE ROJA.

LETICIA ORTIZ AGUILAR                                                           4 DM

NO. DE LISTA: 35

LABORATORIO CLÍNICO

INDICES ERITROCITARIOS (VALORES ABSOLUTOS)

FORMULAS Y RESULTADOS:

VALOR Hto. % x 10     = V.C.C en M3

N° ERITROCITOS/L

VALORES NORMALES:

82 - 92 M

46% x 10 = 88.8 M3                 NORMAL

  5.18/L

     Hb en gr/dL x 10    = H.C.M. en pg

N° ERITROCITOS/L

VALORES NORMALES:

28 - 32 pg

15.28 gr/dL x 10 = 29.49 pg     NORMAL 

       5.18/L

Hb en gr/dL x 10  = C.H.C.M. en %

VALOR Hto %

VALORES NORMALES.

32 - 36

15.28 gr/dL x 10  = 33.21%      NORMAL

         46%

 fotografías 

  

 

 

conclusión 

En esta practica que realizamos se trato de los indices eritrocitarios con la

finalidad de que aplicaramos  lo ya aprendido durante practicas pasadas como es recuento eritrocitario, determinación de hemoglobina y hematocrito; lo cual nos ayuda a detrminar resultados para comprobar si nuestro pasiente se encuentra con niveles bajos de hemoglobina, hematocrito etc.

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    "DETERMINACIÓN DE LA HEMOGLOBINA"

OBJETIVO. Determinar cuantos gr. de hemoglobina (Hb) hay en toda la sangre circulante, para tener un diagnostico clínico ya que se pueden varias diversas enfermedades debido a un valor anormal de Hb.

Fundamento:

La hemoglobina es una proteína conjugada que sirve para el transporte de oxigeno y dióxido de carbono. La masa total de eritrocitos de un adulto contiene unos 600gr. De hemoglobina capaces de transportar 800 ml de oxígeno.

Una molécula de hemoglobina consta de 2 pares de cadenas polipepticas (unión de aminoácidos) (globina) y 4 grupos proteicos HEM que contienen cada uno un átomo de fe en estado ferroso. Cada punto HEM se localiza en una zona determinada de una de las cadenas de polipepticos. Localizando cerca la superficie de la molécula, el HEM se combina de forma reversible con una molécula de oxigeno y dióxido de carbono. Este grupo HEM es el responsable del del color rojo de la hemoglobina (hb).

La parte proteica o globina tiene 4 cadenas polipeptidicas que se denominan con las letras α, β, γ, δ. Existe una cadena mas la ε que esta presente durante los 3 primeros meses de vida se diferencian unas de las otras en el numero o posición (de los aminoácidos de los que están compuestas). Por lo tanto existen varios tipos de hb. en el ser humano se pueden encontrar las siguientes hemoglobinas normales:

Hemoglobina A: consta de 2 cadenas α y 2 cadenas β en un adulto normal corresponde a mas del 95% del total.

Hemoglobina A´: consta de 2 cadenas α y 2 cadenas δ en un adulto sano esta en porción menor de 3%.

Hemoglobina F (fetal): consta de 2 cadenas α y 2 cadenas γ. Es la hemoglobina principal en el feto desde el 4° mes del embarazo hasta aproximadamente los 6 meses de edad. La Hb F tiene mayor afinidad por el oxigeno.

Hemoglobina Gower: consta de 2 cadenas α y 2 cadenas ε. Desaparece casi por completo en el tercer mes de embarazo y empieza a aparecer la Hb fetal.

Reactivos:  Reactivo Drabkin  Ferrocianuro de potasio  Cianuro de potasio  Bicarbonato de potasio  Solución estándar de cianometahemoglobina  Reactivos biológicos:  Sangre venosa con EDTA.

Material y Equipo:

espectrofotómetro.

 Una pipeta de vidrio graduada de 5 mL

 Pipeta semiautomática

 Tubos de ensayo.

 Gradilla

 gasa

Procedmiento

1.-En un tubo de 13 x 100 colocar exactamente 5 mL de reactivo de Drabkin, marcarlo como problema (P).

2.-Obtener 5 ml de sangre venosa con anticoagulante (EDTA).

3.- Mezclar perfectamente la sangre problema, por inversión por lo menos 20 veces antes de tomar la muestra.

4.-Con una pipeta automática o pipeta de Shali se toma exactamente 0,02 mL (20 µL) de sangre total, limpiar luego la punta de la pipeta con papel.

5.-La sangre tomada del tubo con EDTA se vierte en el tubo que contenga reactivo de Drabkin. Se enjuaga 3 veces y se mezcla.

6.- Mezcle la solución de Drabkin con la sangre por inversión y con mucha precaución

7.-Dejar en reposo por espacio de 3 a 5 minutos. Para que se  efectúe la reacción.

MEDICIÓN EN EL ESPECTROFOTOMETRO

1.- encender el espectrofotometro y proseguir con la lectura.....

RESULTADOS:

Formula:  muestra/estándar X 15 = Hb

Muestra 1:

Absorbancia: .294

Estándar: .340

.294/.340 X 15 = 12.9705 g/dL         NORMAL

Muestra 2:

Absorbancia: .337

Estándar: .340

.337/.340 X 15 = 14.8675 g/dL         NORMAL

 conclusión:

Esta prectica nos es util para Poder determinar el volumen de Hb que hay en la sangre y asi como tambien ayuda a identificar o descartas enfermedades.