CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO industrial y de servicios No. 199

"EMILIANO ZAPATA SALAZAR"

MIXQUIAHUALA HGO.

ANALIZA Y FRACCIONA SANGRE CON FINES TRANSFUSIONALES.

VDRL.

Antígeno de cardiolipina para investigar reaginas de la sífilis en Suero sin inactivar, en Plasma y      L.C.R. (no requiere reconstitución)

Agente de Diagnóstico

INTRODUCCIÓN:

Treponema pallidum, la bacteria que causa la sífilis, una enfermedad que generalmente se transmite por vía sexual.

Su diagnóstico puede ser serológico, con lo que se pueden determinar dos clases de anticuerpos:

1.    Tipo “cardiolipina”.- No treponema e inespecíficos.

2.    Antitreponemas específicos.

La prueba realizada Venereal Disease Research Laboratory VDRL se le conoce como una prueba para sífilis no-treponémica. Es parte de la exploración inicial de la sífilis e iniciar un tratamiento. Con  el método cualitativo empleando la  placa presenta floculación, si se presenta el caso se lleva a cabo el método cuantitativo con el o los sueros positivos.

También se emplea en el cuidado prenatal del embarazo, así como parte de los estudios de laboratorio prenatales.

MATERIAL:

•     Placa cóncava
•      Puntillas
•     Aguja No. 21 sin bisel
•     Cronómetro

EQUIPO:

•   ¨Pipeta semiautomática
• Microscopio
• Muestra
•    Suero (Obtener 3 ml. de sangre por punción venosa, centrifugar y separar el suero)
• Reactivo Antígeno VDRL y los Sueros de Controles (almacenados 2-8°C)

      PROCEDIMIENTO:

    

  MÉTODO CUALITATIVO.

1. Depositar 0.05 ml. de suero problema en un anillo de la placa cóncava.

2. En otro anillo colocar una gota de suero control positivo y en el anillo siguiente una gota 

de suero control negativo, extendiendo dentro de los mismos.

3. Añadir una gota del antígeno en suspensión previamente resuspendido en cada muestra 

con la aguja N.21

4. Colocar la placa sobre un agitador mecánico a 180 rpm durante 4 min.

 (Nota: lo realizamos de forma manual a falta de agitador). 

Las pruebas que se realizan en un clima extremadamente seco pueden evaporarse, por lo tanto

la paca se cubre con la tapa de una caja Petri humedecida.

RESULTADOS:
      Paciente 1 : POSITIVO (Presencia de floculacion)

MÉTODO CUANTITATIVO.  
    

    1. Seleccionar los sueros positivos obtenidos en la prueba cualitativa.
    2. Colocar en una gradilla 6 tubos y numerarlos.
    3. Agregar a cada uno 0.5 ml. de solución salina al 9%.
    4. Depositar 0.5 ml. de suero al tubo 1 y mezclar.   
    5. Pasar 0.5 ml. del tubo 1 al tubo 2 mezclar.
    6. Pasar 0.5 ml. del tubo 2 al tubo 3 mezclar
    7. Continuar con este proceso hasta el tubo 6. 
    8. Depositar 0.05 ml. de cada una de las diluciones sobre los diferentes anillos de la placa 
cóncava.
    9. Añadir una gota del antígeno en suspensión estabilizado (VDRL) utilizando la aguja No.21 sin 
bisel a cada dilución.
    10. Colocar la placa sobre un agitador mecánico a 180 rpm. Durante 4 min.
    11. Leer al microscopio con objetivo seco débil 10x.
    Resultados e interpretación
    El título del suero problema será la última dilución que presente un resultado positivo. Ejemplo:
    Si se presenta floculación hasta el tubo 3 – dilución 1:8, por lo tanto el título será 1:8.
     Nota: 
    1.Sueros extremadamente turbios o hemolizados son insatisfactorios para la prueba.
    2. Sueros débiles positivos y fuertes evidencias clínicas de la enfermedad es conveniente 
efectuar la prueba cuantitativa, ya que ocasionalmente pueden presentar el fenómeno de 
prozona.
    3. Si la lectura del resultado no se realiza inmediatamente después de los 4 min. puede secarse 
la reacción y dificultad en la interpretación.
    4. El antígeno en suspensión debe estar a temperatura ambiente antes de ser utilizado.